色谱柱

YMC-Triart Bio C18

YMC-Triart Bio C18是一款有机杂化硅胶基质的大孔C18色谱柱,适用于多肽、蛋白、寡核苷酸等的分离。因其硅胶填料的疏水性偏低,因此也适用于用常规C18保留过强想要缩短分析时间的状况。

规格

基质

有机杂化硅胶
颗粒径 1.9 µm, 3 µm, 5 µm
孔径 30 nm
pH使用范围 1~12
USP Class L1
产品特点
  • 适于用标准C18保留过强的化合物的短时间分析

适于分子量从1万开始的多肽到蛋白的分离

孔径对多肽、蛋白分离的影响

下图为关于分子量从1,859到76,000的多肽、蛋白的分析数据,比较了30nm的Triart Bio C18、Triart Bio C4和12nm的Triart C18对这些物质分离后获得的半峰宽。从结果可以看到当分子量超过1万时,使用C18(12nm)获得的半峰宽增大即存在峰展宽,而使用大孔径色谱柱(30nm)即使是对高分子蛋白亦展示出良好峰形。从此数据可以看出,当分离蛋白质的分子量超过1万时,适合选用30nm的大孔径色谱柱。

Column

150 X 3.0 mmI.D.

Eluent

A) water/TFA (100/0.1)
B) acetonitrile/TFA (100/0.1)
10-95%B (0-15 min)

Flow rate

0.425 mL/min

Temperature

40ºC

Detection

UV at 220 nm

Injection

4 µL (0.1-0.5 mg/mL)

Sample

γ-Endorphin (MW 1,859), Insulin (MW 5,733),
Lysozyme (MW 14,000), β-Lactoglobulin (MW 18,363),
α-Chymotrypsinogen A (MW 25,656),
BSA (MW 66,000), Conalbumin (MW 76,000)

人生长激素(MW 22,000) 的分析案例

从30nm Triart Bio C18、Triart Bio C4 和12nm Triart C18分析分子量为22,000的人生长激素结果看,对于蛋白质等分子量偏大的化合物选用能使分子充分扩散的大孔色谱柱是适合的。另外,在该分析案例中,与Triart Bio C4相比,官能团(烷基链)更长的Triart Bio C18对临近杂质的分离效果更佳。

Column

150 X 3.0 mmI.D.

Eluent

A) water/TFA (100/0.1)
B) acetonitrile/TFA (100/0.08)
50-70%B (0-15 min)

Flow rate

0.425 mL/min

Temperature

40ºC

Detection

UV at 220 nm

Injection

8 µL

Sample

Human growth hormone (0.1 mg/mL)

添加了甲酸的流动相条件亦可获得良好峰形

Triart Bio C18在添加甲酸的流动相条件下亦可获得良好峰形,因此该产品也很适合于LC-MS的高灵敏度分析与构造解析。

Column

150 X 3.0 mmI.D., 150 X 4.6 mmI.D.

Eluent

A) water/formic acid (100/0.1)
B) acetonitrile/formic acid (100/0.08)
45-65%B (0-15 min)

Flow rate

0.425 mL/min for 3.0 mmI.D.
1.0 mL/min for 4.6 mmI.D.

Temperature

40ºC

Detection

UV at 220 nm

Sample

Human growth hormone (0.1 mg/mL)